ATP酶活性检测试剂盒介绍

　　NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
产品货号：BC8843
产品名称：Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
产品规格：100T/48S
Na+k+—ATP酶活性检测试剂盒抗逆
产品简介：
中文名称：Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒
英文名称：Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
别名：Na+k+――ATP酶试剂盒Na+k+――ATP酶测试盒
规格：100T/48S
检测方法：微量法Spectrophotometer/Microplate Reader
储存条件：Store at-20℃，6 months
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
Na+K+-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、*处理(可适当调整待测*量，具体比例可以参考文献)
1、细菌、细胞或组织*的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一，超声波破碎细菌或细胞(功率200w，超声3s，间隔10s，重复30次)：8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：称取约0.1g组织，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清(浆)*：直接检测。
二、测定步骤
1、可见分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至660nm，可见分光光度计需用蒸馏水调零。
三、Na+K+-ATP酶活计算
1、血清(浆)Na*K*-ATPase活力的计算：
larbio
定义：规定每小时每毫升血清(浆)中Na+K+-ATP酶分解ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/mL)=C标x(A测定-A对照)+(A标准-A空白)xV总+V样+TxF
=7.5x(A测定-A对照)+(A标准-A空白)xF
2、组织、细菌或细胞中Na*K*-ATPase活力的计算：
(1)按蛋白浓度计算：
定义：规定每小时每毫克组织蛋白中Na+K+-ATP酶分解ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/mg prot)=C标x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)xV总÷(CprxV样)÷TxF
=7.5x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)+CprxF
(2)按*质量计算：
定义：规定每小时每克组织中Na+K+-ATP酶分解ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/g质量)=C标x(A测定-A对照)+(A标准-A空白)xV总+(V样+V样总xW)÷TxF
-7.5x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)÷WxF
(3)按细菌或细胞数量计算：
定义：规定每小时每1万个细菌或细胞中Na+K+-ATP酶分解ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。
Na+K+-ATP酶活力(U/104cell)=C标x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)xV总÷(V样÷V样总xN)÷TxF
=7.5x(A测定-A对照)+(A标准-A空白)xF
C标：标准管浓度，0.5μmol/mL：V总：酶促反应总体积，0.25mL;V样：加入*体积，0.1mL：V样总：加入试剂一体积，1mL;T：反应时间，1/6小时：Cpr：*蛋白质浓度，mg/mL：W：*质量，g;N：细菌或细胞总数，以万计：F：*稀释倍数。
注意事项：
1、由于每一个样都必须做对照，本试剂盒100管保证测48份Na*K*-ATP酶。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。
Na+k+—ATP酶活性检测试剂盒抗逆
产品订购信息：
BC8843 Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit 100T/48S
http://www.nbbio1688.com/Products-39116923.html
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